マウス

バイオサイトジェンはEGE™技術やESCゲノム編集技術を利用して、C57BL/6、BALB/c、DBA2やNOD-scidなどを含む多種類のマウスに対し遺伝子組み換えをしています。CRISPR-Cas9を基盤とするEGE™技術及びESC技術を基盤とするモデルの作製期間はそれぞれ6～8ヶ月、9～12ヶ月になります。マウスは寿命が短く且つ人の遺伝子と似ているため、マウスモデルは代表的な哺乳類動物のモデルになります。ですので、マウスはゲノミクス、トランスクリプトミクス、プロテオミクス及び表現型に関して、最も深く研究されている哺乳類動物のモデルでもあります。

種族：研究用のマウス種族は遠親交系と近親交系に分かれています。飼育の間、遠親交系マウスは雑合率が高くなりますが、近親交系マウスは純合率が高くなります。近親交系（または閉鎖群）は長期的に近親交配を繰り返し遺伝子型が一致している特定種の個体になります。 近親交系は少なくでも20世代の近親交配を行って、この種族の個体の間98.6%以上の遺伝子座がホモ接合であり、それぞれの個体に有効性が備わっています。よく使われてる近親交系マウスはC57BL/6（N及びJ），BALB/c，Fvb，A/J，C3H，CBA，DBA/2などがいます。

CRISPR/EGE™もしくはESC/HR：バイオサイトジェンでは、85％のマウスモデルと100%のラットモデルはEGE™技術で作製しています。ESC技術を基盤にするプロジェクトと比較すると、EGE™技術によるモデルの作製は値段が安くて納期も短いです。但し、ノックインDNA断片が15kb以上のプロジェクトの場合にはESC/HR技術方法を勧めています。

過排卵：1980年代末から過剰排卵は遺伝子変異マウスの作製に用いられていました。人工誘発によって雌マウスから大量の卵母細胞の採取が可能になりました。過剰排卵誘発技術はゲノム編集マウスの作製を促進するだけでなく、動物の使用数も減らせることが可能になります。

繁殖と飼育：マウスの繁殖と飼育はゲノム編集マウスモデル作製の重要なプロセスであり、適切な繁殖環境は産子数の増加並びにマウスの作製期間の短縮にとて重要です。バイオサイトジェンはAAALACの認証のSPF動物飼育施設でラット/マウスに適切な繁殖環境を提供しています。弊社の専門技術スタッフの設計した効率の良い飼育繁殖ソリューションにより、お客様のコストや納期を削減します。

応用事例：

CD3eヒト化マウスモデルの作製と検証

ゲノム編集策略：

タンパク質発現分析の解析：

Splenocytes from both wild type (WT) C57BL/6 and homozygous B-hCD3ε mice were analyzed by flow cytometry.

Results: Mouse CD3+ cells were detectable in the WT C57BL/6 mice, whereas human CD3+ cells were detectable in the homozygous knockin mouse B-hCD3ε.